【課程大綱】南京2025版《中國藥典》醫療器械無菌微生物檢驗員
Ⅱ 、Ⅲ類醫療器械企業無菌檢 (化) 驗人員，醫用口罩檢驗人員；體 外診斷試劑企業微生物檢驗員，潔凈環境檢測人員等。根據《醫療器 械生產企業許可證現場審查標準》和《醫療器械生產企業監督檢查計 劃》，每個企業應有 2 名以上專職檢驗人員。
《不合格品控制記錄)
5.2(銷售管理制度)
5.3《退貨記錄)
5，4《不合格品銷毀記錄)
一次性使用無菌醫療器械質量事故處理
控制程序
1目的
確保及時處理產品質量事故，消除事故影響，避免再發生。
2適用范圍
適用所經營一次性使用醫療器械產品的質量事故的處理。
二、常用無菌醫療器械性能要求
v 一次性使用塑料血袋為例（GB1 42 32.1 《 人體血液 及液成分袋式塑料容器 第1 部分：傳統型血袋 》) ：
3 、生物學評價按GB/T 16 8 86.1 規定進行。應考 慮評價的項目包括細胞毒性、致敏、皮內反應、
急性全身毒性、血液相容性等。
4 、微生物不透過性塑料血袋應不透過微生物
5 、抗泄漏充水至公稱容量并將其密封，在3 70 ℃ 下 離心，在(23 士5) ℃ 下，擠壓不泄漏；對 于 軟聚氯乙烯(PVC) 血袋，在4 ℃ 下重復上述試驗。
6 、熱穩定性塑 料 血袋充水至公稱容量的一半， 塑料血袋應能承受緩慢冷凍至一80 ℃ 的低溫環境， 貯存24 h ，隨后浸人(37 士2) ℃ 的水浴中60 min ， 然后再恢復至室溫，塑料血袋應仍能經離心、擠 壓不、泄漏。
7 、微粒污染塑 料 血 袋的生產應避免微粒污染。
二、常用無菌醫療器械性能要求
及相關標準
v 4 、一次性衛生敷料
主要產品
v 醫用脫脂棉、外科紗布敷料、一次性使用產包、 一次性使用手術衣、一次性使用手術帽、一次 性使用手術口罩、一次性使用防護服、一次性 使用防護口罩、各種生物敷料等
主要性能要求及標準 v 以一次性手術衣為例
阻微生物穿透（干態- 濕態）
潔凈度（微生物- 微粒物質）
落絮
阻液體穿透
脹破強度（干態- 濕態）
拉伸強度（干態- 濕態）
二、常用無菌醫療器械性能要求 及相關標準
v 5 、各種醫用導管
血管內導管
v 主要產品和相關標準
體外循環管路及透析裝置 v 主要產品和相關標準
穿刺用導管及各種插管、引流管 v 主要產品和相關標準 目前這類產品的標準
有GB19335 《 一次性 使用血路產品通用技 術條件 》 、YY91048 《 人工心肺機 硅橡
膠泵管 》 、YY 02 67 《 血液凈化裝置的體 外循環血路 》 、YY 00 53 《 空心纖維透析 器 》 、GB1 22 64 《 人 工心肺機 體外循環 管道 》 、YY 04 64 《 一次性使用空心纖 維血液灌流器 》 、 YY 04 65 《 一次性使 用空心纖維血漿分離
二、無菌檢驗員培訓內容
1 、微生物基礎知識
1) 檢測實驗用培養基配制、滅菌；培養基、器具滅菌等相關問題詳講；
2) 查看大腸、銅綠、金葡各種培養基生長情況，三種菌劃平板
3) 供試液制備、細菌菌落、初始污染菌檢測；
4) 生產人員手、臺面、工作服菌落計數實驗操作；
5) 大腸桿菌檢測、綠膿桿菌及金黃色葡萄球菌檢測方法、操作步驟；
GB18457-2001 制造醫療機械用不銹鋼針管——耐腐蝕性
要求 按下述試驗方法試驗時，針管浸泡的部位不得有腐蝕痕跡。
原理 將針管的部分在氯化鈉溶液中浸泡規定時間后，將浸泡的部位與未浸泡部位比較，用目力觀察腐蝕痕跡。 儀器和試劑 用符合GB 66 82-19 92標準中3級水要求的蒸餾水或去離子水。配置c（NaCl）=0.5 mol/L（分析純試劑）溶液。 選擇合適的實驗室用硼硅酸鹽玻璃器皿。
試驗程序 將一支針管放入盛有23 ℃±2 ℃的氯化鈉溶液的玻璃器皿中，使針管的一半長度侵入溶液中。并保持溶液和針管在23 ℃±2 ℃放置7 h ±5 min。取出針管用蒸餾水或去離子水漂洗并干燥，用正常視力或矯正視力對浸泡和未浸泡部位觀察比較，有否浸泡而導致的腐蝕痕跡。
三、無菌檢驗員培訓價格
初級1400元，中級16 00元，高級18 00元。
四、無菌檢驗員聯系老師
企證技術服務 李老師：131 6081 2615 （V同）
關于醫療器械標準，我們可以劃分為兩類，一類 是檢驗標準，包括產品標準和試驗方法標準，另 一類是管理標準，像YY 02 87 （IS O1 34 85 ）體系、 YY/T03 16 （ISO 14 7 91 ）風險分析、YY 02 79 （IS O1 41 55 ）臨床調查等，這些標準的特點是：1. 器械生產行為 。2. 具有很廣泛覆蓋面和 適用性。3. 很少有量化指標。多是根據企業是否按 去做，來判定是 " 符合 " 還是 " 不符合 " 。 4. 性。是全世界醫療器械范圍內的生產、管理 專家的集體智慧與經驗的總結。5. 國際性。大部是 由ISO 標準轉化而來。 因此這類標準與行政法規有良好的相容關系。有 些行政法規是在借鑒這些標準的基礎上建立起來 ，有些標準則是為了配合現行法規的要求而制 定的。也可以這么說，這些標準就為本 《 規范 》 的實施提供了指南。
一次性輸液器——概念
簡介
一種主要用于靜脈輸液的經過無菌處理的、建立 靜脈與藥液之間通道的常見的一次性的醫療耗材
。
v 工作原理
在大氣壓力作用下，瓶內液體流入較細的輸液軟 管形成水柱，當水柱壓力大于靜脈壓時，瓶內的 流入靜脈。
二、一次性輸液器——概念
3 、無菌基礎知識
1) 無菌檢查兩種實驗方法：直接接種法、薄膜過濾法
2) 純化水微生物限度檢測實驗
3) 查看斜面實驗結果；
4) 實驗總結；修正系數講解；培養基靈敏度；產品方法適用性實驗；
5) 菌種傳代與保存；
6) 微粒污染；潔凈環境監測。
供試品的制備
創可貼供試品：將包裝好的創可貼打開，用剪刀將創可貼剪碎，放入100ml pH7.0氯化鈉—蛋白胨緩沖液中浸泡1小時，取水層作為供試品。
7.3. 試驗菌液的制備
7.3.1. 接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物至營養瓊脂培養基斜面中,置30－35℃培養18-24小時，分別取用3-5ml 0.9％的無菌氯化鈉溶液，反復吹洗，沖下菌苔，震蕩80次，用10倍遞增稀釋制成每1ml含菌數小于100 CFU的菌懸液。
7.3.2. 接種生孢梭菌的新鮮培養物至12ml硫乙醇酸鹽流體培養基中,30～35℃培養18～24小時，取上述培養物1ml加9ml0.9%無菌氯化鈉溶液10倍遞增稀釋制成每1ml含菌數小于100 CFU的菌懸液。
7.3.3. 接種白色念珠菌的新鮮培養物至10ml改良馬丁培養基中，置23－28℃培養24-48小時，取上述培養物1ml加9ml 0.9％的無菌氯化鈉溶液10倍遞增稀釋制成每1ml含菌數小于100CFU的
菌懸液。
7.3.4. 接種黑曲霉的新鮮培養物至改良馬丁瓊脂斜面培養基中,置23-28℃培養5-7天，使大量孢子形成。用3-5ml0.9％的無菌氯化鈉溶液將孢子洗脫并過濾孢子懸液至無菌試管內作為原液，取1m原液加9ml 0.9％的無菌氯化鈉溶液10倍遞增逐級稀釋制成每1ml含孢子數小于100CFU的孢子懸液。
7.4.培養基靈敏度檢查
取每管裝量為12ml的硫乙醇酸鹽流體培養基9支，分別接種小于100 CFU的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌菌懸液各1ml，每種培養基各接種2支，另1支不接種作為空白對照，培養3天；取每管裝量為9ml的改良馬丁培養基5支，分別接種小于100 CFU的白色念珠菌、黑曲霉菌懸液各1ml，每種培養基各接種2支，另1支不接種作為空白對照，培養5天，逐日觀察結果。空白對照管無菌生長,加菌的培養基管均生長良好,判靈敏度檢查合格。
硫乙醇酸鹽流體培養基：
擬驗證的創可貼無菌檢查試驗方法
分別取創可貼供試品，加入相應的硫乙醇酸鹽流體培養基與改良馬丁培養基各1 00ml，細菌于30～35℃培養14天，真菌于23～28℃培養14天。同時每天觀察并記錄實驗結果。
7.6.驗證試驗的方法
7.6.1.將創可貼供試品分別人工污染小于10 0cfu的金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、銅綠假單胞菌、生孢梭菌、黑曲霉、白色念株菌菌懸液后加入相應的硫乙醇酸鹽流體培養基與改良馬丁培養基各1 00ml，作為供試品陽性對照組；另分別取裝有同體積培養基的容器，加入等量試驗菌，作為陽性對照組；同時平行做緩沖液的陰性對照組。
7.6.2.細菌于30～35℃培養5天，真菌于23～28℃培養5天。每天觀察并記錄實驗結果。
7.7.可接受標準
陰性對照呈陰性，陽性對照呈陽性，供試品陽性對照組微生物生長情況與陽性對照組一致，說明創可貼按照《無菌檢查法標準操作規程》操作，供試品對微生物生長無不良影響，則創可貼的無菌檢查方法通過。
. 驗證條件
6.1. 儀表量器經過校驗合格，且在有效期內。
6.2. 供試品：隨機抽取浙江紅雨醫藥有司生產的3個批次醫用無菌創可貼
6.3. 培養基及試劑：
6.3.1. 試劑試液：
0.9%氯化鈉、氯化鈉—蛋白胨緩沖液，配制記錄見附件1
6.3.2. 培養基
硫乙醇酸鹽流體培養基 生產廠家： 杭州微生物試劑有限公司 批號：20 140 2 21-00
改良馬丁培養基 生產廠家： 杭州微生物試劑有限公司 批號：20 13 11 18-00
營養瓊脂培養基 生產廠家： 杭州微生物試劑有限公司 批號：20 15 04 28-03
改良馬丁瓊脂培養基 生產廠家： 杭州微生物試劑有限公司 批號：20 14 0 3 22-00
蛋白胨 生產廠家：杭州微生物試劑有限公司 批號：20 14 04 17-00
培養基配制記錄見附件2。
6.4. 驗證用菌株：
金黃色葡萄球菌 【CMCC（B）26 0 03】
銅綠假單胞菌 【CMCC（B）10 1 04】
枯草芽孢桿菌 【CMCC（B）63 5 01】
生孢梭菌 【CMCC（B）64 9 41】
白色念珠菌 【CMCC（F）98 0 01】
黑曲霉 【CMCC（F）9 8 0 03】
標準菌株購自：浙江省食品藥品檢驗研究中心
各驗證用菌種傳代記錄見附件3。
日期：
硫乙醇酸鹽流體培養基 改良馬丁培養基
結論
注備：
檢測人/日期： 復核人/日期：
2025版《中國藥典》醫療器械無菌微生物檢驗員
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【講師介紹】1. 醫療器械口罩防護用品行業標準微生物檢驗方法；
2. 產品的無菌檢驗方法、培養基適用性檢查及產品方法適用性試驗；
3. 初始污染菌檢驗方法、計數培養基適用性檢查及產品修正系數；
4. 純化水微生物限度檢驗及所有培養基適用性檢查；
5. 潔凈間監測方法及問題解析；
6. 不同供試品的制備方法；
7. 實驗所有菌種保藏、管理、傳代和使用技術；
企證技術服務 李老師：131 6081 2615 （V同）
【培訓對象】Ⅱ 、Ⅲ類醫療器械企業無菌檢 (化) 驗人員，醫用口罩檢驗人員；體 外診斷試劑企業微生物檢驗員，潔凈環境檢測人員等。根據《醫療器 械生產企業許可證現場審查標準》和《醫療器械生產企業監督檢查計 劃》，每個企業應有 2 名以上專職檢驗人員。
企證技術服務 李老師：131 6081 2615 （V同）
更新時間：2026/5/29 9:19:49
