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【課程大綱】

什么是微生物檢驗(yàn)員？

微生物檢驗(yàn)員怎么獲取？企業(yè)怎么獲取微生物檢驗(yàn)員證書？


方法：濾膜、材質(zhì)、過濾等相關(guān)要求。 操作注意：避免微生物受損，降低檢出。 取相當(dāng)于1g或1ml供試品的供試液lml直接過濾，或加至 100ml稀釋劑中，混勻，過濾。用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩 沖液或其它適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同"方 法的驗(yàn)證"。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板 上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。

菌數(shù)報(bào)告規(guī)則：以相當(dāng)于1g或1ml供試品的菌落數(shù)報(bào)告；若濾膜上無菌落生長，以＜1報(bào)告菌數(shù)（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或乘以稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。


一、微生物檢驗(yàn)員證書頒發(fā)：

CCAA。 

二、微生物檢驗(yàn)員證書培訓(xùn)費(fèi)用：

1480元，費(fèi)用包含：培訓(xùn)費(fèi)、資料費(fèi)、證書費(fèi)、快遞費(fèi)、發(fā)票。 


土壤樣品的采集與處理 ：通常不做土壤中微生物檢測(cè)，只在特殊情況下進(jìn)行。如大批水果罐頭受微生物的污染而變質(zhì)時(shí)，為追查原因而對(duì)水果產(chǎn)地的土壤進(jìn)行檢驗(yàn)分析等特殊情況。 樣品采集的方法：滅菌刀或滅菌鏟出去土壤表層，用灼燒過的勺采取200-300g土壤置于無菌容器中，標(biāo)明采樣地點(diǎn)、深度、時(shí)間等。 樣品處理的方法：土壤置于滅菌的乳缽中研磨均勻，稱取50g于500mL無菌水中，充分震蕩混勻后制成1:10的稀釋液，再根據(jù)檢驗(yàn)需求進(jìn)一步稀釋，測(cè)定指標(biāo)微生物（如菌落總數(shù)、霉菌、酵母菌等）。

食品微生物樣品的采集與處理

一）食品微生物檢驗(yàn)的取樣方案 ：目的不同，取樣方案不同。 國內(nèi)外使用的采樣方案多種多樣，如國際食品微生物規(guī)范委員會(huì)（簡稱ICMSF）是根據(jù)事先給食品進(jìn)行的危害程度劃分而確定（表1-3），我國則根據(jù)事先對(duì)食品類別的劃分而確定（表1-4）。


三、微生物檢驗(yàn)員證書培訓(xùn)內(nèi)容

1.檢驗(yàn)的化學(xué)基礎(chǔ);

2.實(shí)驗(yàn)室安全知識(shí);

3.實(shí)驗(yàn)室常用儀器講解;

4.檢驗(yàn)技術(shù)及微生物檢驗(yàn)技術(shù)，大腸桿菌，菌落總數(shù)，無菌、藥典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志賀氏菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌等菌種的實(shí)操視頻。 

四、微生物檢驗(yàn)員證書培訓(xùn)相關(guān)


（一） 檢驗(yàn)前準(zhǔn)備 ：(1)準(zhǔn)備好所需的各種儀器 如冰箱、恒溫水浴箱、顯微鏡等。 (2)各種玻璃儀器 如吸管、平皿、廣口瓶、試管等均需刷洗干凈(121℃，20min)或干法(160℃一170℃，2h)滅菌，冷卻后送無菌室備用。 (3)準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)所需的各種試劑、藥品 做好普通瓊脂培養(yǎng)基或其他選擇性培養(yǎng)基，根據(jù)需要分裝試管或滅菌后傾注平板或保存在46℃的水浴中或保存在4℃的冰箱中備用。

(4)無菌室滅菌 如用紫外燈法滅菌，時(shí)間不應(yīng)少于45min，關(guān)燈半小時(shí)后方可進(jìn)入工作；如用超凈工作臺(tái)，需提前半小時(shí)開機(jī)。必要時(shí)進(jìn)行無菌室的空氣檢驗(yàn)，把瓊脂平板暴露在空氣中15min，培養(yǎng)后每個(gè)平板上不得超過15個(gè)菌落。 (5)檢驗(yàn)人員的工作衣、帽、鞋、口罩等滅菌后備用 工作人員進(jìn)入無菌室后．實(shí)驗(yàn)沒完成前不得隨便出入無菌室。


五、微生物檢驗(yàn)員證書相關(guān)


1、瓶裝液體樣品的處理 :用點(diǎn)燃的酒精棉球灼燒瓶口滅菌，接著用石炭酸或來蘇爾消毒后的紗布蓋好，再用滅菌開瓶器將蓋啟開； 含有二氧化碳的樣品可倒入500mL磨口瓶內(nèi)，口勿蓋緊，覆蓋一滅菌紗布，輕輕搖蕩，待氣體全部逸出后，取樣25mL檢驗(yàn)。

2、盒裝或軟塑料包裝樣品的處理 :將其開口處用75%酒精棉擦拭消毒，用滅菌剪子剪開包裝，覆蓋上滅菌紗布或浸有消毒液的紗布在剪開部分，直接吸取樣品25mL ，或傾入另一滅菌容器中再取樣25mL檢驗(yàn)。

固體樣品的處理：1、搗碎均質(zhì)法 ;將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g放入帶225mL稀釋液的無菌均質(zhì)杯中，8000~10000r/min均質(zhì)1~2min即可。

剪碎振搖法:將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣進(jìn)一步剪碎，放入帶225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。

研磨法 :將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣放入無菌乳缽中充分研磨后，再放入帶有225mL無菌稀釋液的稀釋瓶中，蓋緊蓋后充分搖勻。

整粒振搖法 :直接稱取25g整粒樣品置于帶有225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。



誤差是客觀存在的 誤差分類 ：根據(jù)誤差產(chǎn)生的原因和性質(zhì)將誤差分為系統(tǒng)誤差和偶然誤差。 系統(tǒng)誤差：又稱可測(cè)誤差，由化驗(yàn)操作過程中某些固定原因造成的。 具有單向性，即正負(fù)、大小都有一定的規(guī)律性，當(dāng)重復(fù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析時(shí)會(huì)重復(fù)出現(xiàn)。 若找出原因，即可設(shè)法減少到可忽略的程度。

系統(tǒng)誤差 產(chǎn)生原因 方法：指化驗(yàn)方法本身造成的誤差。如沉淀的溶解、反應(yīng)不完全、指示劑終點(diǎn)與化學(xué)計(jì)量點(diǎn)不符合等。 儀器：由于使用的儀器本身不夠精密所造成的。 試劑：由于試劑不純或蒸餾水不純，含有被測(cè)物或干擾物而引起的誤差。 操作：由于化驗(yàn)人員對(duì)分析操作不熟練，對(duì)終點(diǎn)顏色敏感性不同、對(duì)刻度讀數(shù)不正確等引起。 校正方法： 采用標(biāo)準(zhǔn)方法與標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)； 校正儀器減小儀器誤差； 采用純度高的試劑校正試劑誤差； 提高人員業(yè)務(wù)水平，減少操作誤差。

偶然誤差：隨機(jī)的、不可避免的，呈正態(tài)分布又稱隨機(jī)誤差，是由某些難以控制、無法避免的偶然因素造成的，其大小與正負(fù)都是不固定的。如操作中溫度、濕度、灰塵等的影響都會(huì)引起分析數(shù)值的波動(dòng)。 產(chǎn)生原因：操作中溫度、濕度、灰分等的影響都會(huì)引起分析數(shù)值的波動(dòng)。 減少偶然誤差應(yīng)重復(fù)多次平行實(shí)驗(yàn)并取平均值。 過失誤差：操作人員的粗心大意或未按操作規(guī)程做，可避免。


1、樣品的采取和送檢 :a、散裝或大型包裝的乳品
   用滅菌刀、勺取樣，在移采另一件樣品前，刀、勺清洗滅菌。采樣時(shí)應(yīng)注意部位的代表性。每件樣品數(shù)量不少于200g，放入滅菌容器內(nèi)及時(shí)送檢。鮮乳一般不應(yīng)超過3h，在氣溫較高或路途較遠(yuǎn)的情況下應(yīng)進(jìn)行冷藏，不得使用任何防腐劑。 

樣品的采取和送檢 :小型包裝的乳品
     應(yīng)采取整件包裝，采樣時(shí)應(yīng)注意包裝的完整。各種小型包裝乳與乳制品，每件樣品量為：生奶1瓶或1包；消毒奶1瓶或1包；奶粉1瓶或1包（大包裝者200g）；奶油1塊（113g）；酸奶1瓶或1罐；煉乳1瓶或1罐；奶酪1個(gè)。
c、成批產(chǎn)品
  對(duì)成批產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量鑒定時(shí)，其采樣數(shù)量每批以千分之一計(jì)算，不足千件者抽取1件。 
、鮮奶、酸奶 無菌操作去掉瓶口的紙罩紙蓋，瓶口火焰消毒，以無菌操作吸取25ml檢樣，放入裝有225ml滅菌生理鹽水的三角瓶內(nèi)，振搖均勻（酸乳如有水分析出于表層，應(yīng)先去除）。 b、煉乳 將瓶或罐先用溫水洗凈表面，再用點(diǎn)燃酒精棉球消毒瓶或罐的上表面，然后用滅菌的開罐器打開罐（瓶），以無菌操作稱取25g（ml）檢樣，放入裝有225ml滅菌生理鹽水的三角燒瓶內(nèi)，振搖均勻。

【講師介紹】

微生物檢驗(yàn)員
食品化學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)室
醫(yī)療器械行業(yè)申請(qǐng)GMP
化妝品行業(yè)

【培訓(xùn)對(duì)象】

企業(yè)主管食品質(zhì)量、安全標(biāo)準(zhǔn)及監(jiān)督管理工作崗位的人員、食品生產(chǎn)企業(yè)、經(jīng)銷單位、質(zhì)量監(jiān)督部門、衛(wèi)生檢驗(yàn)部門及有關(guān)科研、管理部門的管理人員、技術(shù)人員和檢驗(yàn)人員。

更新時(shí)間：2024/11/18 9:13:48